[0001] [0001]
Die Erfindung betrifft Schädlingsbekämpfungszusammensetzungen und insbesondere ein Azadirachtin enthaltendes biologisches Schädlingsbekämpfungsmittel in fester Form, das durch eine verbesserte Stabilität gekennzeichnet ist. The invention relates to pesticide compositions and more particularly to a azadirachtin-containing biological pesticide in solid form, which is characterized by an improved stability.
[0002] [0002]
Die biologischen Aktivitäten der Samen des Margosa-Baums (neem tree) sind seit langer Zeit bekannt. The biological activities of the seeds of the neem tree (neem tree) have been known for a long time. Von besonderer Bedeutung sind die starken Insektiziden und pestiziden Eigenschaften von Azadirachtin, dem Hauptwirkstoff im Margosa-Samen. Of particular importance are the strong insecticides and pesticidal properties of azadirachtin, the main active ingredient in neem seeds. Azadirachtin ist ein Tetranortriterpenoid, das bei verschiedenen Insekten, Milben, Nematoden und ähnlichen Ordnungen eine Hemmung der Nahrungsaufnahme und eine Unterbrechung des Wachstums bewirkt. Azadirachtin is a tetranortriterpenoid that causes at various insects, mites, nematodes, and similar systems, inhibition of food intake, and an interruption of growth.
[0003] [0003]
Es sind verschiedene Verfahren bekannt, Azadirachtin aus Margosa-Samen zu extrahieren. There are various methods known to extract azadirachtin from neem seeds. Typischerweise umfassen diese Verfahren die Trocknung der Margosa-Samen, das Mahlen der getrockneten Samen zu einem groben Pulver und das Extrahieren des Pulvers mit verschiedenen Lösungsmitteln, wie Methanol, Ethanol, Wasser, Methylenchlorid, Chloroform, Hexan, Methylethylketon, Butanol, Benzin, Ether, Aceton, Methyl-tert.-butylether, Diethylcarbonat und dgl. Im allgemeinen wurde festgestellt, daß eine erhöhte Ausbeute erzielt werden kann, indem man die Lösungsmittelpolarität steigert, dh von Hexan zu Ethanol, von Ethanol zu Methanol und dgl. Jedoch enthalten die Margosa-Samen trotz der anfänglichen Trocknung immer noch 6 bis 15% Wasser. Typically, these methods involve drying the neem seeds, milling the dried seeds to a coarse powder, and extracting the powder with various solvents such as methanol, ethanol, water, methylene chloride, chloroform, hexane, methylethylketone, butanol, benzene, ether, acetone, methyl tert-butyl ether, diethyl carbonate and the like. In general, it has been found that an increased yield can be achieved by increasing the solvent polarity, ie, from hexane to ethanol, ethanol to methanol, and the like. However containing Margosa- seeds despite the initial drying still 6 to 15% water. Während somit zwar durch Verwendung von stärker polaren Lösungsmitteln der Extraktionswirkungsgrad in Bezug auf Azadirachtin erhöht wird, enthält der Extrakt auch einen höheren Anteil des innerhalb der Margosa-Samen enthaltenen Wassers und führt zu wasserhaltigen Extrakten. While it is therefore being increased by use of more polar solvents, the extraction efficiency relative to azadirachtin, the extract also contains a higher proportion of the water contained within the neem seeds and results in aqueous extracts. Dies bedeutet, daß aufgrund der Tatsache, daß Wasser und Azadirachtin eine ähnliche Löslichkeit aufweisen, die zur Extraktion des Azadirachtins aus den Margosa-Samen verwendeten Lösungsmittel auch darin enthaltenes Wasser extrahieren. This means that that water and azadirachtin have due to the fact a similar solubility, also in the solvents used to extract from the neem seeds for the extraction of azadirachtin contained water. Extrakte aus rohen Margosa-Samen können bis zu 20% Wasser enthalten. Extracts of crude neem seeds can contain up to 20% water.
[0004] [0004]
Frühe Untersuchungen über die biologisch aktiven Eigenschaften von Margosa-Samen waren auf die Identifizierung von Fraktionen abgestellt, einschließlich Öl- und Wachsfraktionen, die ihre biologische Aktivität nach der Zubereitung behielten; Early studies of the biologically active properties of neem seeds was directed to identifying fractions, including oil and wax fractions that retained bioactivity after preparation; vgl. z. B. Singh et al., Phytoparasitica, Bd. 16 (1988), S. 3. Das US-Patent 4 556 562, (Larson) beschreibt einen lagerstabilen, angesäuerten, wäßrigen Ethanol-Extrakt von Azadirachtin, der aus gemahlenen Margosa-Samen hergestellt wird. see. z. B. Singh et al., Phytoparasitica, vol. 16 (1988), pp 3. U.S. Patent 4,556,562 (Larson) discloses a storage-stable, acidified aqueous ethanol extract of azadirachtin, from the ground neem seed is produced. Ein anerkanntes Verfahren zur Herstellung von Azadirachtin umfaßt die Extraktion von Öl aus den Samen mit einem Azadirachtin nicht-lösenden Lösungsmittel, wie Hexan, wonach sich ein zweiter Extraktionsvorgang unter Verwendung eines Azadirachtin-lösenden Lösungsmittels, wie Ethanol anschließt, wodurch man eine Azadirachtin enthaltende Extraktlösung erhält. An accepted method for preparing azadirachtin includes extracting oil from the seeds with an azadirachtin-nonsolubilizing solvent such as hexane, whereupon a second extraction process using an azadirachtin-dissolving solvent such as ethanol followed, thereby obtaining an azadirachtin-containing extract solution , Jedoch führt US-Patent 4 946 681 (Walter) aus, daß protische Lösungsmittel mit sauren oder basischen funktionellen Gruppen die Lagerstabilität von Azadirachtin vermindern. However, US Patent 4,946,681 points out (Walter) that protic solvents having acidic or basic functional groups decrease the storage stability of azadirachtin. US-4 946 681 beschreibt ein Verfahren zur Verwendung von Molekularsieben zur Entfernung von Wasser aus einer Extraktlösung ohne Entfernung von Azadirachtin, womit die Lagerstabilität des Extrakts verbessert werden soll. US-4,946,681 describes a method for using molecular sieves to remove water from an extract solution without removing azadirachtin, whereby the storage stability of the extract is to be improved. Das gleiche Patent führt auch aus, daß die Lagerstabilität von Azadirachtin in einer Extraktlösung stark variiert, und zwar je nach dem Lösungsmittelsystem des Extrakts. The same patent also states that the storage stability of azadirachtin in an extract solution varies greatly, depending on the solvent system of the extract. Die Lagerstabilität wird erhöht, wenn die Extraktlösung mehr als 50 mol-% aprotische Lösungsmittel und weniger als 15% Wasser enthält. The storage stability is enhanced when the extract solution comprises more than 50 mol% aprotic solvent and less than 15% water. Aprotische Lösungsmittel sind im US-Patent 4 946 681 als polare Lösungsmittel mit mäßig hohen Dielektrizitätskonstanten beschrieben, die keine sauren Wasserstoffatome enthalten, wozu (ohne Beschränkung hierauf) aliphatische Alkohole, Ketone, Nitrile, substituierte aromatische Verbindungen, Amidsulfoxide, Alkylcarbonate, chlorierte aliphatische Verbindungen, aromatische Aldehyde, Sulfone, Ether, Ester und dgl. oder Gemische davon gehören. Aprotic solvents are described in US Patent 4,946,681 as polar solvents having moderately high dielectric constants which do not contain acidic hydrogen, including, (without limitation) aliphatic alcohols, ketones, nitriles, substituted aromatic compounds, Amidsulfoxide, alkyl carbonates, chlorinated aliphatics aromatic aldehydes, sulfones, ethers, esters and the like. or mixtures thereof belong. Das US-Patent 5 001 146 (Carter et al.) beschreibt die Lagerung von Azadirachtin in nicht-abbauenden Lösungsmittelsystemen, die gegenüber Zubereitungen auf Ethanol-Wasser-Basis eine verbesserte Lagerstabilität gewährleisten. U.S. Patent 5,001,146 (Carter et al.) Describes the storage of azadirachtin in non-degrading solvent systems that provide improved storage stability compared to preparations with ethanol-water basis. Das US-Patent 5 001 146 führt ferner aus, daß dann, wenn es sich beim protischen Lösungsmittel um einen Alkohol handelt, die Konzentration an Wasser unter 5 mol-% liegen muß, wobei diese Konzentration vorzugsweise weniger als 2% und insbesondere weniger als 1% der gesamten Lösung beträgt. US Patent 5,001,146 also states that if it is the protic solvent is an alcohol, the concentration of water must be less than 5 mol%, but this concentration is preferably less than 2% and most preferably less than 1 % is the total solution.
[0005] [0005]
Derzeit handelt es sich bei sämtlichen handelsüblichen Zubereitungen mit einem Gehalt an Azadirachtin um organische Lösungen. Currently, there is in all commercial preparations containing azadirachtin are organic solutions. Die gewerbliche Verwendung von Azadirachtin ist infolge der Lagerinstabilität der Verbindung begrenzt. The commercial use of azadirachtin is limited due to the storage instability of the compound. Wasser wurde als die Hauptursache des Abbaus von Azadirachtin in Lösung ermittelt. Water has been identified as the main cause of degradation of azadirachtin in solution.
[0006] [0006]
Es sind verschiedene Verfahren zur Herstellung von festem Azadirachtin bekannt. Various methods are known for preparing solid azadirachtin known. Das US-Patent 5 397 571 (Roland et al.) beschreibt ein Verfahren zur gemeinsamen Extraktion von Azadirachtin und Margosa-Öl aus gemahlenen Margosa-Samen. U.S. Patent 5,397,571 (Roland et al.) Describes a process for the common extraction of azadirachtin and neem oil from ground neem seeds. Ein Produkt des Verfahrens des US-Patents 5 397 571 ist ein Azadirachtin enthaltender Feststoff mit einem Gehalt an mehr als 10 Gew.-% Azadirachtin. A product of the process of US Patent 5,397,571 is an azadirachtin-containing solid containing more than 10 wt .-% of azadirachtin. Kurz zusammengefaßt, werden bei diesem Verfahren gemahlene Margosa-Samen mit einem Gemisch aus nicht-polaren, aliphatischen Kohlenwasserstoff-Lösungsmitteln und polaren Lösungsmitteln koextrahiert, wobei jeder der Bestandteile in einer ausreichenden Menge vorhanden ist, um eine Extraktion sowohl der angestrebten hydrophilen als auch der angestrebten hydrophoben Komponenten aus den Samen zu ermöglichen. Briefly, ground neem seeds are co-extracted with a mixture of nonpolar, aliphatic hydrocarbon solvents and polar solvents, in this method, each of the components is present in an amount sufficient to provide an extraction both the intended hydrophilic and the desired hydrophobic components from the seeds allow. Die hydrophilen und hydrophoben Anteile des Lösungsmittelextraktgemisches werden sodann voneinander getrennt, vorzugsweise unter Anwendung eines Gegenextraktionsverfahrens, wobei das Lösungsmittel aus dem Lösungsmittelextraktgemisch entfernt wird, wodurch ein Margosa-Extraktgemisch verbleibt, das sowohl die hydrophilen als auch die hydrophoben Anteile enthält. The hydrophilic and hydrophobic portions of the solvent extract mixture are then separated from one another, preferably using a counter-extraction process, wherein said solvent is removed from the solvent extract mixture to obtain a neem extract mixture remains that contains both the hydrophilic and the hydrophobic portions. Das Margosa-Extraktgemisch wird sodann mit einem Lösungsmittel mit einer ausreichend niedrigen Polarität (dh Hexan) in Kontakt gebracht, um den hydrophilen, Azadirachtin enthaltenden Teil des Extrakts in Form eines Feststoffes auszufällen. The neem extract mixture is then contacted with a solvent having a sufficiently low polarity (ie, hexane) in contact to precipitate the hydrophilic, azadirachtin-containing portion of the extract in the form of a solid. Der Feststoff wird sodann durch eine bekannte Technik, z. B. durch Filtration, gewonnen. The solid is then recovered by a known technique, eg., By filtration.
[0007] [0007]
Beim Verfahren von DR Schröder und K. Nakanishi, J. Natural Products, Bd. 50 (1987), S. 241–244, werden Margosa-Samen erschöpfend mit Hexan entfettet und sodann mit 95% Ethanol/5% Wasser extrahiert. In the process of DR Schroeder and K. Nakanishi, J. Natural Products, Vol. 50 (1987), pp 241-244, neem seeds are exhaustively defatted with hexane and then extracted with 95% ethanol / 5% water. Der Ethanol-Extrakt wird sodann mit Petrolether und 95% wäßrigem Methanol ausgeschüttelt. The ethanol extract is then extracted with petroleum ether and 95% aqueous methanol. Die Etherphase, die Öle und nicht-polare Materialien enthält, wird verworfen. The ether phase, containing oils and non-polar materials, is discarded. Die Methanol-Phase wird dann mit Wasser und Essigsäureethylester ausgeschüttelt. The methanol phase is then partitioned with water and ethyl acetate. Die Wasserphase wird verworfen und die Essigsäureethylester-Phase wird unter Vakuum durch eine Lage eines Si-Gels filtriert und sodann eingeengt. The water phase is discarded and the acetate phase is vacuum filtered through a pad of Si-gel, and then concentrated. Das eingeengte Filtrat wird einer Vakuum-Flüssigchromatographie in Hexan-Essigsäureethylester (1 : 3) unterworfen. The concentrated filtrate is subjected to vacuum liquid chromatography in hexane-ethyl acetate (1: 3) subjected. Die Azadirachtin enthaltenden Fraktionen (Reinheit 70–80%) werden vereinigt und Azadirachtin wird unter Verwendung von Tetrachlorkohlenstoff kristallisiert. The azadirachtin-containing fractions (70-80% purity) were combined and azadirachtin is crystallized using carbon tetrachloride. Eine endgültige Reinigung erfolgt durch Flash-Chromatographie in CHCl 3 /MeCN, 3 : 1. A final purification is carried out by flash chromatography in CHCl 3 / MeCN, 3: 1.
[0008] [0008]
Vorhandene Azadirachtin enthaltende Feststoffe bieten zwar gegenüber flüssigen Zubereitungen Vorteile, sind aber instabil und stellen besondere Anforderungen an die Lagerung. Existing azadirachtin-containing solids have indeed over liquid preparations benefits, but are unstable and have special requirements for storage. Schroeder und Nakanishi erkannten die Instabilität ihres festen Produkts und stellten fest, daß das Material bei Aufbewahrung in Kolben bei Raumtemperatur eine Halbwertszeit von etwa 4 Monaten aufweist; Schroeder and Nakanishi recognized the instability of their solid product and found that the material at room temperature has a half-life of about 4 months when stored in flasks; aa OS 243, Anmerkung 3. aa OS 243, note. 3
[0009] [0009]
Es wäre erstrebenswert, einen lagerstabilen, Azadirachtin enthaltenden Feststoff bereitzustellen, der bei Vereinigung mit Lösungsmitteln, oberflächenaktiven Mitteln oder Dispergiermitteln ein lagerstabiles Mittel zur biologischen Schädlingsbekämpfung ergibt. It would be desirable to provide a storage-stable, azadirachtin-containing solid which is stable on storage biocontrol agents results when combined with solvents, surfactants or dispersants.
[0010] [0010]
WO 95/02962 beschreibt ein Verfahren zur Herstellung eines Azadirachtin-Konzentrats durch Extraktion von Azadirachtin enthaltenden Ölen aus Pflanzenmaterialien und die Fällung des Azadirachtins aus den Ölen unter Verwendung eines nicht-polaren Lösungsmittels, in dem Azadirachtin eine geringe Löslichkeit aufweist. WO 95/02962 describes a method for producing a azadirachtin concentrate by extracting azadirachtin-containing oils from plant materials, and precipitating the azadirachtin from the oils using a non-polar solvent in which azadirachtin has low solubility. WO 92/16109 beschreibt ein Verfahren zur Herstellung eines lagerstabilen, an Azadirachtin reichen Insektizids aus Samenkernen des Margosa-Baums. WO 92/16109 describes a process for preparing a storage-stable, azadirachtin-rich insecticide from sperm nuclei of the neem tree.
[0011] [0011]
Die Erfindung läßt sich zusammenfassend so darstellen, daß die Stabilität eines Azadirachtin enthaltenden Feststoffes erhöht wird, indem man aus dem Feststoff flüchtige, polare Lösungsmittel bis zu einer Konzentration von etwa 5 Gew.-% oder weniger und Wasser bis zu einer Konzentration von weniger als 1% entfernt. The invention can be summarized display so that the stability of a solid containing azadirachtin is increased by one from the solid volatile, polar solvent to a concentration of about 5 wt .-% or less, and water to a concentration of less than 1 % removed.
[0012] [0012]
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, eine feste Azadirachtin-Zubereitung bereitzustellen, die im Vergleich zu vorhandenen festen Zubereitungen stabiler ist und bei dem die besonderen Anforderungen vorhandener Zubereitungen an die Lagerung entfallen. The object of the present invention is to provide a solid azadirachtin formulation that is more stable in comparison with existing solid formulations, and in which account for the particular requirements of existing formulations for storage.
[0013] [0013]
Ein Vorteil der vorliegenden Erfindung besteht darin, daß festes Azadirachtin mit einem Gehalt an etwa 5 Gew.-% oder weniger an flüchtigen, polaren Lösungsmitteln und weniger als 1% Wasser leichter ist, leichter transportiert werden kann und weniger entzündlich ist als vorhandene flüssige Zubereitungen. An advantage of the present invention is that solid azadirachtin is easier with a content of about 5 wt .-% or less of volatile polar solvents and less than 1% water, can be easily transported, and less flammable than existing liquid formulations. Außerdem behält die erfindungsgemäße Zubereitung ihre Stabilität auch nach langen Lagerzeiten. In addition, the preparation of the invention maintains its stability even after long periods of storage.
[0014] [0014]
Weitere Ziele, Vorteile und Merkmale der vorliegenden Erfindung ergeben sich beim Studium der folgenden ausführlichen Beschreibung. Other objects, advantages and features of the present invention will become apparent upon reading the following detailed description.
[0015] [0015]
Die vorliegende Erfindung stellt ein festes Schädlingsbekämpfungsmittel bereit, das folgendes umfaßt: The present invention provides a solid pesticide prepared, comprising:
Azadirachtin; Azadirachtin;
ein oder mehr flüchtige polare Lösungsmittel in einer Gesamtkonzentration von nicht mehr als etwa 5 Gew.-%; one or more volatile polar solvents at a total concentration of not more than about 5 wt .-%; und and
Wasser in einer Menge von nicht mehr als 1%; Water in an amount of not more than 1%;
wobei die Schädlingsbekämpfungszubereitung nach zweiwöchiger Lagerung in einem verschlossenen Behälter bei 55°C sich in einem freifließenden Zustand befindet. the biocontrol formulation at 55 ° C is in a free-flowing condition after two weeks of storage in a sealed container.
[0016] [0016]
Die vorliegende Erfindung betrifft einen lagerstabilen, Azadirachtin enthaltenden Feststoff und daraus hergestellte Schädlingsbekämpfungszubereitungen. The present invention relates to a storage-stable, azadirachtin-containing solids and derived pesticide formulations. Bei der Schädlingsbekämpfungszubereitung kann es sich um den Azadirachtin enthaltenden Feststoff selbst, der aus Margosa-Samen erhalten worden ist, handeln. In the biocontrol formulation may be around the azadirachtin-containing solid itself, which is obtained from neem seeds act. Vorzugsweise handelt es sich aber um den auf an sich bekannte Art zubereiteten Feststoff in Kombination mit Verdünnungsmitteln, oberflächenaktiven Mitteln oder Dispergiermitteln, um ein Schädlingsbekämpfungsmittel herzustellen, das sich für die Lagerung, den Transport und die Anwendung als Schädlingsbekämpfungsmittel eignet. Preferably, however, is prepared on the manner known per se solid in combination with diluents, surfactants or dispersants to produce a pesticide that is suitable as pesticides for storage, transport and use. Eine Bezugnahme auf eine "feste Schädlingsbekämpfungszubereitung" umfaßt hier sowohl den aus den Samen erhaltenen, Azadirachtin enthaltenden Feststoff sowie den Feststoff in Kombination mit Verdünnungsmitteln, oberflächenaktiven Mitteln oder Dispergiermitteln. A reference to a "solid biocontrol formulation" as used herein includes both obtained from the seeds, solids containing azadirachtin as well as the solid in combination with diluents, surfactants or dispersants. Die "Schädlingsbekämpfung" umfaßt eine insektizide oder pestizide Aktivität. The "pest control" includes an insecticidal or pesticidal activity. Die Schädlingsbekämpfung umfaßt auch Wirkungen zur Vermeidung von Insekten- und Schädlingsaktivitäten, wie sie aus der Anwendung von Azadirachtin enthaltenden Zubereitungen bekannt sind. The pest control also includes effects for the prevention of insect and pest activity, as they are known from application of azadirachtin-containing formulations. Es ist darauf hinzuweisen, daß eine angemessene Schädlingsbekämpfung erreicht werden kann, ohne die Insekten zu töten. It should be noted that an appropriate pest control can be achieved without killing the insects. Die Schädlingsbekämpfung kann die Fähigkeit zur Abstoßung von Insekten oder anderen Schädlingen von Pflanzenoberflächen, Schädlingen in verschiedenen Lebensstadien, insbesondere im Ei- und Larvenstadium, und die Bekämpfung von Pilzpathogenen umfassen. The pest may include the ability to repelling insects or other pests from plant surfaces, pests at various life stages, especially in the egg and larval stage, and control fungal pathogens. Gemäß der vorliegenden Anmeldung behält ein "lagerstabiler", Azadirachtin enthaltender Feststoff seine freifließenden Eigenschaften nach zweiwöchiger Lagerung bei 55°C in einem verschlossenen Behälter. According to the present application keeps a "shelf-stable" azadirachtin-containing solid its free-flowing properties after two weeks of storage at 55 ° C in a sealed container. Das Azadirachtin in einer bevorzugten, lagerstabilen, festen Zubereitung weist ferner eine Gesamtzersetzungsgeschwindigkeitskonstante des Azadirachtins von weniger als 0,03 pro 1 Tag auf und bleibt nach zweiwöchiger Lagerung bei 55°C in einem verschlossenen Behälter zu mindestens 75% unabgebaut. The azadirachtin in a preferred storage-stable solid formulation also has a total azadirachtin decomposition rate constant of less than 0.03 per one day and remains after two weeks of storage at 55 ° C in a sealed container at least 75% undegraded.
[0017] [0017]
Obgleich ein nach einem bekannten Verfahren hergestellter Azadirachtin enthaltender Feststoff in vorteilhafter Weise nach dem erfindungsgemäßen Verfahren behandelt werden kann, wird der Azadirachtin enthaltende Feststoff vorzugsweise gemäß dem Verfahren von Roland et al. Although a produced by a known method azadirachtin-containing solid can be treated in an advantageous manner by the process according to the invention, the azadirachtin-containing solid is preferably according to the method of Roland et al. (US-Patent 5 397 571) hergestellt. (US Patent 5397571) was prepared.
[0018] [0018]
Das Verfahren gemäß Roland et al. The method according to Roland et al. beinhaltet die Extraktion von gemahlenen Margosa-Samen mit einem Lösungsmittelgemisch aus einem unpolaren, aliphatischen Kohlenwasserstoff-Lösungsmittel und einem polaren Lösungsmittel für eine Zeitspanne und eine Temperatur, die ausreichen, um einen Margosa-Extrakt zu erhalten, der sowohl den hydrophilen, Azadirachtin enthaltenden Anteil als auch den hydrophoben Margosa-Ölanteil der Samen enthält. involves extraction of ground neem seeds with a solvent mixture of a nonpolar, aliphatic hydrocarbon solvent and a polar solvent for a time and a temperature sufficient to obtain a neem extract having both the hydrophilic azadirachtin-containing portion as also contains the hydrophobic neem oil content of the seeds. Das Extraktionsverfahren kann bei einer Temperatur bis zu etwa 25°C über der Siedetemperatur des Lösungsmittelextraktionsgemisches durchgeführt werden. The extraction process can be carried out at a temperature up to about 25 ° C above the boiling point of the solvent extraction mixture. Vorzugsweise wird die Extraktion bei einer Temperatur von etwa 40 bis etwa 60°C durchgeführt. Preferably, the extraction at a temperature of about 40 is carried out to about 60 ° C. Die Extraktion wird für eine Zeitspanne durchgeführt, die zur Erzielung einer optimalen Extraktion der Margosa-Samen ausreicht. The extraction is carried out for a period of time sufficient to achieve an optimum extraction of the neem seeds. Vorzugsweise wird das Extraktionsverfahren etwa 2 bis etwa 12 Stunden durchgeführt. Preferably, the extraction process is carried out for about 2 to about 12 hours. Gegebenenfalls kann das gemeinsame Extraktionsverfahren wiederholt werden, um den Extraktionswirkungsgrad zu optimieren. Optionally, the co-extraction process will be repeated to optimize the extraction efficiency. Im Anschluß an die Extraktion wird der durch die gemeinsame Extrakt erhaltene Margosa-Extrakt einer Behandlung unterzogen, um die hydrophilen und hydrophoben Anteile des Extrakts zu trennen. Following the extraction, the obtained extract through the common neem extract is subjected to a treatment to separate the hydrophilic and hydrophobic portions of the extract.
[0019] [0019]
Das Extraktionsverfahren gemäß Roland et al. The extraction process according to Roland et al. kann unter Verwendung verschiedener Kombinationen eines unpolaren, aliphatischen Kohlenwasserstoff-Lösungsmittel und eines polaren Lösungsmittels durchgeführt werden. can be carried out using various combinations of a nonpolar, aliphatic hydrocarbon solvent and a polar solvent. Für die Zwecke dieser Erfindung umfassen die unpolaren, aliphatischen Kohlenwasserstoffe solche aliphatischen Kohlenwasserstoffe, die eine hohe Löslichkeit des Margosa-Öls aufweisen und im wesentlichen keine Löslichkeit für Azadirachtin oder Wasser zeigen. For purposes of this invention, the nonpolar, aliphatic hydrocarbons include those aliphatic hydrocarbons having high neem solubility of the oil-and show essentially no solubility for azadirachtin or water. Zu geeigneten aliphatischen Kohlenwasserstoffen gehören (ohne Beschränkung hierauf) aliphatische Kohlenwasserstoffe und halogenierte aliphatische Kohlenwasserstoffe mit 1 bis 20 und vorzugsweise 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, wie Pentan, Hexan, Heptan, Octan, Nonan, Decan, Isooctan, Chlorpentan, Chlorhexan und dgl. sowie deren Isomere; Suitable aliphatic hydrocarbons include (without limitation) aliphatic hydrocarbons and halogenated aliphatic hydrocarbons having from 1 to 20 and preferably 1 to 10 carbon atoms, such as pentane, hexane, heptane, octane, nonane, decane, isooctane, chloropentane, chlorohexane, and the like., As well as their isomers; Erdöldestillate, Petrolether und dgl. und Gemische davon. Petroleum distillates, petroleum ether, etc., And mixtures thereof. Verschiedene andere unpolare aliphatische Kohlenwasserstoffe mit den vorstehenden Eigenschaften sind dem Fachmann geläufig. Various other nonpolar aliphatic hydrocarbons having the above characteristics are familiar to the expert. Die Wahl des speziellen Lösungsmittels ist an sich nicht kritisch, vorausgesetzt, daß es im wesentlichen Azadirachtin nicht löst und Margosa-Öl darin eine hohe Löslichkeit aufweist. The choice of the particular solvent itself is not critical, provided that it does not dissolve substantially azadirachtin and neem oil in it has a high solubility. Vorzugsweise ist das unpolare aliphatische Kohlenwasserstoff-Lösungsmittel mit dem gewählten polaren Lösungsmittel unter Bildung einer im wesentlichen homogenen Lösung mischbar. Preferably, the nonpolar aliphatic hydrocarbon solvent with the selected polar solvent is miscible to form a substantially homogeneous solution.
[0020] [0020]
Zu polaren Lösungsmitteln, die sich für das gemeinsame Extraktionsverfahren eignen, gehören beliebige polare Lösungsmittel, die einen hohen Grad an Löslichkeit für Azadirachtin aufweisen. To polar solvents which are suitable for the common extraction process include any polar solvents which have a high degree of azadirachtin solubility. Vorzugsweise ist das polare Lösungsmittel mit dem unpolaren Lösungsmittel unter Bildung einer im wesentlichen homogenen Lösung mischbar. Preferably, the polar solvent is miscible with the nonpolar solvent to form a substantially homogeneous solution. Zu geeigneten polaren Lösungsmitteln gehören (ohne Beschränkung hierauf) aliphatische Alkohole, Ketone, Nitrile, substituierte aromatische Verbindungen, wie alkylierte oder halogenierte aromatische Verbindungen, Amidsulfoxide, Alkylcarbonate, chlorierte aliphatische Verbindungen, aromatische Aldehyde, Sulfone, Ether, Ester und dgl. oder Gemische davon. Suitable polar solvents include (without limitation) aliphatic alcohols, ketones, nitriles, substituted aromatic compounds, such as alkylated or halogenated aromatic compounds, Amidsulfoxide, alkyl carbonates, chlorinated aliphatics, aromatic aldehydes, sulfones, ethers, esters and the like. Or mixtures thereof , Zu bevorzugten polaren Lösungsmitteln für das Verfahren der gemeinsamen Extraktion gehören (ohne Beschränkung hierauf) aliphatische Alkohole, wie Methanol, Ethanol, Propanol, Isopropanol, Butanol, 2-Butanol, tert.-Butanol, Benzylalkohol und dgl. und Gemische davon. Preferred polar solvents for the process of the common extraction thereof include (without limitation) aliphatic alcohols such as methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, 2-butanol, tert-butanol, benzyl alcohol and the like. And mixtures thereof. Der hier verwendete Ausdruck "Alkyl" bezieht sich auf Alkyl-Gruppen mit 1 bis 10 und vorzugsweise mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. The term "alkyl" as used herein refers to alkyl groups having from 1 to 10 and preferably having 1 to 6 carbon atoms.
[0021] [0021]
Die Konzentration des unpolaren, aliphatischen Kohlenwasserstoff-Lösungsmittels und der polaren Lösungsmittel, die sich für das gemeinsame Extraktionsverfahren eignen, kann variieren. The concentration of the nonpolar, aliphatic hydrocarbon solvent and polar solvents useful in the co-extraction process may vary. Im allgemeinen sollen die unpolaren, aliphatischen Kohlenwasserstoff-Lösungsmittel und polaren Lösungsmittel im Lösungsmittelgemisch in Mengen vorliegen, die die angestrebte Extraktion sowohl der hydrophilen als auch der hydrophoben Komponenten aus den Margosa-Samen ermöglichen. In general, the nonpolar, aliphatic hydrocarbon solvent and polar solvent in the solvent mixture should be present in amounts which permit the desired extraction of both the hydrophilic and the hydrophobic components from the neem seeds. Zu erfindungsgemäß geeigneten Lösungsmittelgemischen gehören Gemische aus etwa 10 bis etwa 90 Gew.-% des unpolaren, aliphatischen Kohlenwasserstoff-Lösungsmittels und etwa 90 bis etwa 10 Gew.-% des polaren Lösungsmittels. At the present invention suitable solvent mixtures are mixtures of about 10 to about 90 wt .-% of the nonpolar, aliphatic hydrocarbon solvent and about 90 to about 10 wt .-% of the polar solvent. Vorzugsweise umfassen die erfindungsgemäß geeigneten Lösungsmittelgemische etwa 40 bis etwa 70 Gew.-% des unpolaren, aliphatischen Kohlenwasserstoff-Lösungsmittels und etwa 30 bis etwa 60 Gew.-% des polaren Lösungsmittels, insbesondere etwa 60 Gew.-% des unpolaren, aliphatischen Kohlenwasserstoff-Lösungsmittels und etwa 40 Gew.-% des polaren Lösungsmittels. Preferably, the invention suitable solvent mixtures comprise from about 40 to about 70 wt .-% of the nonpolar, aliphatic hydrocarbon solvent and about 30 to about 60 wt .-% of the polar solvent, more preferably about 60 wt .-% of the nonpolar, aliphatic hydrocarbon solvent and about 40 wt .-% of the polar solvent.
[0022] [0022]
Die Trennung der hydrophilen und hydrophoben Anteile des Lösungsmittelextraktionsgemisches wird mittels dem Fachmann geläufiger Maßnahmen vorgenommen. The separation of the hydrophilic and hydrophobic portions of the solvent extract mixture is carried out by means familiar to the expert measures. Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform wird ein Gegenextraktionsverfahren herangezogen. According to a preferred embodiment, a counter-extraction process is used. Beim Gegenextraktionsverfahren wird der mit dem Lösungsmittelgemisch erhaltene Margosa-Extrakt einer Abstreifung des Lösungsmittels unterzogen, um das "Margosa-Extraktgemisch" zu gewinnen. During the return extraction method, the obtained with the mixed solvent neem extract a stripping the solvent is subjected to win the "neem extract mixture". Der Ausdruck "Margosa-Extraktgemisch" wird zur Bezeichnung eines Margosa-Extrakts verwendet, der sowohl den hydrophilen Azadirachtin enthaltenden Teil der Margosa-Samen als auch den hydrophoben Margosa-Ölteil. The term "neem extract mixture" is used to describe a margosa extract which. Both the hydrophilic azadirachtin-containing portion of the neem seeds and the hydrophobic neem oil portion der Samen enthält, woraus im wesentlichen das gesamte zur gemeinsamen Extraktion verwendete Lösungsmittel entfernt worden ist. containing the seeds, from which all the solvent used for the common extraction has been substantially removed. Das Margosa-Extraktgemisch wird anschließend mit einem Lösungsmittel von ausreichend niedriger Polarität, dh Hexan, in Kontakt gebracht, um den hydrophilen, Azadirachtin enthaltenden Teil des Extrakts als Feststoff auszufällen. The neem extract mixture is then mixed with a solvent of sufficiently low polarity, ie, hexane, brought into contact to precipitate the hydrophilic, azadirachtin-containing portion of the extract as a solid. Der Feststoff wird durch bekannte Techniken, z. B. durch Filtration, gewonnen. The solid was purified by known techniques, such as by filtration., Won. Der gemäß diesem Verfahren gebildete, Azadirachtin enthaltende Feststoff enthält hohe Konzentrationen an Azadirachtin, dh mehr als 10 Gew.-%, vorzugsweise mehr als 15 Gew.-% und insbesondere mehr als 20 Gew.-% Azadirachtin. The formed according to this method, azadirachtin-containing solid contains high concentrations of azadirachtin, ie more than 10 wt .-%, preferably more than 15 wt .-% and especially more than 20 wt .-% of azadirachtin. Der restliche hydrophobe Margosa-Ölteil des Extraktgemisches wird durch Entfernen des Lösungsmittels aus dem Filtrat gewonnen. The remaining hydrophobic neem oil portion of the extract mixture is obtained by removing the solvent from the filtrate.
[0023] [0023]
Beim Azadirachtin enthaltenen Feststoff handelt es sich offensichtlich um ein trockenes, weiß bis beigefarbenes freifließendes Pulver. When azadirachtin solids contained there obviously is a dry, white to beige free flowing powder. Der Feststoff kann auf bekannte Weise mit Verdünnungsmitteln, oberflächenaktiven Mitteln oder Dispergiermitteln zur Bildung verschiedener Zubereitungen, die sich zur Anwendung als Insektizide oder Pestizide eignen, vereinigt werden. The solid may be in a known manner with diluents, surfactants or dispersants to form various formulations suitable for application as insecticides or pesticides pooled. Die auf diese Weise hergestellten Zubereitungen erweisen sich gegenüber emulgierbaren flüssigen Zubereitungen als vorteilhaft, da sie leichter und damit einfacher zu transportieren sind. The preparations obtained in this way prove against emulsifiable liquid preparations to be advantageous because they are lighter and therefore easier to transport. Ferner unterliegen unbehandelte, Azadirachtin enthaltende Feststoffe unter üblichen Lagerungsbedingungen einem sehr raschen Abbau, so daß es bei Zubereitungen, die den Feststoff enthalten, zu einer verminderten Aktivität kommt. In addition, untreated azadirachtin-containing solids under normal storage conditions are subject to very rapid degradation, so that it comes to a decreased activity in preparations containing the solid.
[0024] [0024]
Die erfindungsgemäßen Zubereitungen können zusätzlich zu dem Azadirachtin enthaltenden Feststoff ein festes Verdünnungsmittel, typischerweise in einer Menge bis zu 99 Gew.-%, enthalten. The preparations of the invention may in addition to the azadirachtin-containing solid, a solid diluent, typically in an amount up to 99 wt .-%, of. Die Zubereitung kann ein oberflächenaktives Mittel typischerweise in einer Menge bis zu 5 Gew.-% oder weniger und vorzugsweise von 0,05 bis 2 Gew.-% enthalten. The composition may comprise in an amount up to 5 wt .-% or less, and preferably from 0.05 to 2 wt .-%, a surfactant typically.
[0025] [0025]
Gemäß der Darlegung durch die folgenden Beispiele trägt im Azadirachtin enthaltenden Feststoff die Anwesenheit von flüchtigen polaren Verbindungen zu einer verringerten Stabilität des Feststoffes bei. According to the statement by the following examples carries solids contained in the azadirachtin in the presence of volatile polar compounds in decreased stability of the solid. Im Gegensatz dazu erweisen sich die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren behandelten Materialien als lagerstabil. In contrast, treated by the inventive materials prove to be stable in storage. Obgleich der Möglichkeit, festes Material anstelle von flüssigem Material zu transportieren, demgemäß der Vorzug gegeben wird, gab es bisher keine praktische Möglichkeit einen Azadirachtin enthaltenden Feststoff herzustellen, der während der notwendigen Transport- und Lagerzeiten eine ausreichende Aktivität als Schädlingsbekämpfungsmittel behält. Although the possibility of transporting solid material instead of liquid material, therefore, preference is given, there has been no practical way to produce a solid containing azadirachtin, which retains sufficient activity as pesticides during the necessary transport and storage times.
[0026] [0026]
In den erfindungsgemäß hergestellten Zubereitungen werden flüchtige, polare Lösungsmittel im Azadirachtin enthaltenden Feststoff entfernt und vorzugsweise auf eine Konzentration von etwa 5% oder darunter verringert, indem man das Azadirachtin trocknet. In the preparations according to the invention volatile polar solvents are removed in the azadirachtin-containing solid, and preferably reduced to a concentration of about 5% or less, by drying the azadirachtin. Unter dem Ausdruck "etwa 5%" versteht die Anmelderin auch feste Zubereitungen mit einer Gesamtkonzentration an flüchtigen, polaren Lösungsmitteln, die nahe bei 5% liegen und die charakteristische Fähigkeit zeigen, nach zweiwöchiger Lagerung bei 55°C die Beschaffenheit als weiß bis beigefarbener, freifließender Feststoff zu behalten. By the term "about 5%" refers to the applicant, and solid formulations with a total concentration of volatile polar solvents, which are close to 5%, and show the characteristic ability, after two weeks of storage at 55 ° C, the texture as white to beige, free-flowing to retain solid. Die Konzentration an flüchtigen, polaren Lösungsmitteln liegt vorzugsweise unter 2% und insbesondere bei 1% oder darunter oder bei 0,5% oder darunter, bezogen auf das Gewicht des Feststoffes. The concentration of volatile polar solvents is preferably less than 2%, and especially at 1% or less or 0.5% or less, based on the weight of the solid. Die Konzentration an flüchtigen, polaren Lösungsmitteln kann auch Null betragen, wenn während der Trocknungsstufe sämtliche Lösungsmittel entfernt worden sind. The concentration of volatile polar solvents can also be zero, if all solvents have been removed during the drying step. Der Ausdruck "polare Lösungsmittel" umfaßt Wasser und beliebige andere Lösungsmittel, die sich zur Herstellung des Azadirachtin enthaltenden Feststoffes eignen, wozu (ohne Beschränkung hierauf) die vorstehend in Verbindung mit der Herstellung des festen Materials nach dem Verfahren von Roland et al. The term "polar solvent" includes water and any other solvents suitable for the preparation of the solid azadirachtin-containing, including (but not limited to) the above in connection with the manufacture of the solid material by the method of Roland et al. (auf diese Literaturstelle wird durch Verweis Bezug genommen) erwähnten Lösungsmittel gehören. (In this publication will be made by reference) are mentioned solvents. Der Ausdruck "Alkohol" umfaßt beliebige Alkohole, die aufgrund ihrer polaren Natur bei der Herstellung von Azadirachtin aus Margosa-Pflanzenmaterial verwendet werden können. The term "alcohol" includes any alcohols which can be used due to their polar nature in the preparation of azadirachtin from neem plant material. Im Stand der Technik ist es bekannt, daß die Polarität von bestimmten aliphatischen Alkoholen (Methanol, Ethanol, Propanol, Butanol und dgl.) oder von verzweigten Alkoholen die Gewinnung von Azadirachtin aus Margosa beeinflußt, und daß trotz der Tatsache, daß Ethanol in breitem Umfang bei der Reinigung von Azadirachtin verwendet wird, auch andere Alkohole verwendet werden können, die dann die feste Azadirachtin-Zubereitung verunreinigen würden und deshalb in vorteilhafter Weise nach dem erfindungsgemäßen Verfahren zu entfernen sind. In the prior art it is known that the polarity of particular aliphatic alcohols (methanol, ethanol, propanol, butanol and the like.) Or branched alcohols affects the recovery of azadirachtin from neem, and that in spite of the fact that ethanol widely is used in the purification of azadirachtin, other alcohols can be used, which would then contaminate the solid azadirachtin preparation and must therefore be removed in an advantageous manner by the process according to the invention.
[0027] [0027]
Die Trocknung wird vorzugsweise durch Erwärmen in einem Ofen auf eine Temperatur und für eine Zeitspanne, die zu einer Verringerung des Gehalts an flüchtigen Lösungsmitteln auf weniger als etwa 5% (vorzugsweise auf weniger als 1%) und seiner Verringerung des Wassergehalts auf weniger als 1% ausreichen. The drying is preferably by heating in an oven to a temperature and for a period of time to reduce the content of volatile solvents to less than about 5% (preferably to less than 1%) and its reduction of the water content to less than 1% to be enough. Die Proben werden während der Trocknungsstufe in unverschlossenen Behältern aufbewahrt, um den Austritt der flüchtigen, polaren Lösungsmittel aus dem festen Azadirachtin zu ermöglichen. The samples are stored during the drying step in unsealed containers, to allow the escape of the volatile polar solvent from the solid azadirachtin. Die für die Trocknung unter atmosphärischen Bedingungen gewählte Temperatur soll gleichmäßig sein und liegt vorzugsweise über Raumtemperatur, jedoch unterhalb des Schmelzpunkts der festen, Azadirachtin enthaltenden Zubereitung. The chosen for the drying temperature under atmospheric conditions should be uniform and is preferably above room temperature but below the melting point of the solid azadirachtin-containing formulation. Alternativ kann auch eine Trocknungstemperatur unter Raumtemperatur gewählt werden. Alternatively, a drying temperature are chosen below room temperature. Eine ausreichende Trocknungszeit ist empirisch durch routinemäßiges Testen des Feststoffes während der Trocknung festzulegen, um festzustellen, ob der Feststoff weniger als etwa 1 Gew.-% an flüchtigen, polaren Lösungsmitteln enthält. A sufficient drying time is empirically determine by routine testing of the solid during drying to determine whether the wt .-% solid contains less than about 1 volatile, polar solvents.
[0028] [0028]
Für den Fachmann ist es ferner ersichtlich, daß andere Trocknungsverfahren auf die festen, Azadirachtin enthaltenden Zubereitungen angewandt werden können, um die erfindungsgemäße, lagerstabile Zubereitung herzustellen. For the expert it is also obvious that other drying methods may be applied to the solid azadirachtin-containing preparations to make the preparation of the invention, storage-stable. Derartige Verfahren umfassen das Lyophilisieren oder Behandeln des festen Präparats mit einem Trocknungsmittel: Das Verfahren, gemäß dem die flüchtigen, polaren Lösungsmittel aus dem Azadirachtin enthaltenden Feststoff entfernt werden, ist nicht als eine Beschränkung des Schutzumfangs der Erfindung anzusehen. Such methods comprise lyophilizing or treating the solid preparation with a drying agent: The method, according to which the volatile polar solvents are removed from the azadirachtin-containing solid, is not to be regarded as a restriction on the scope of the invention.
[0029] [0029]
Die Lagerstabilität eines Azadirachtin enthaltenden Feststoffes, der weniger als etwa 1% Wasser und weniger als 5% flüchtige, polare Lösungsmittel enthält, sowie die Abbauwirkung von polaren Lösungsmitteln auf die Stabilität werden in den folgenden Beispielen dargelegt. The storage stability of an azadirachtin-containing solid, containing less than about 1% water and less than 5% volatile polar solvents, as well as the degradation effect of polar solvents on stability will be set forth in the following examples. Diese Beispiele dienen lediglich der Erläuterung der Erfindung und stellen keine Beschränkung dar. These examples are merely illustrative of the invention and are not limiting.
Beispiele Examples
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1. Festes Azadirachtin mit einem Gehalt an mehr als etwa 1% Wasser zersetzt sich bei Lagerung bei 55°C innerhalb einiger Wochen. 1. Solid azadirachtin containing more than about 1% water decomposes when stored at 55 ° C within a few weeks.
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Eine Anzahl von Proben von Azadirachtin enthaltenden, weißen bis beigefarbenen Feststoffen aus fünf verschiedenen Chargen, die gemäß dem Verfahren von Roland et al. Containing a number of samples of azadirachtin, white to beige solids from five different batches. According to the method of Roland et al (US-Patent 5 397 571) hergestellt worden waren, wurden in getrennte verschlossene Glasfläschchen mit einem Fassungsvermögen von 3,697 ml (1 dram) gegeben und in einem Trockenschrank bei 55°C aufbewahrt. (US Patent 5,397,571) were made were (1 dram) in separate sealed glass vial with a capacity of 3,697 ml of and kept in an oven at 55 ° C. Im Verlauf der nächsten Wochen wurden von jeder Charge aus dem Trockenschrank Feststoffproben entnommen und in bezug auf das Erscheinungsbild und den Azadirachtin-Gehalt analysiert. Over the next few weeks were taken from each batch from the oven and solid samples analyzed in relation to the appearance and azadirachtin content. Die in Tabelle 1 aufgeführten Ergebnisse zeigten, daß bei Proben der Chargen 002, 003 und 004 eine signifikante Zersetzung von Azadirachtin in Verbindung mit einem braunen, eine Schmelze anzeigenden Erscheinungsbild aufgetreten war. The results listed in Table 1 showed that samples of the batches 002, 003 and 004 a significant decomposition of azadirachtin in conjunction with a brown appearance indicating a melt had occurred. Im Gegensatz dazu blieben die Proben 006 und 009 weiß und zeigten eine sehr geringe Azadirachtin-Zersetzung und behielten ihre freifließenden Eigenschaften. In contrast, the samples were 006 and 009 white and showed very little azadirachtin decomposition and retained their free-flowing properties. Diese Eigenschaften sind charakteristisch sowohl für Azadirachtin enthaltende Feststoffe, die gemäß den vorstehenden Angaben hergestellt und behandelt worden sind, sowie für derartige Feststoffe, die in einer Zubereitung mit entsprechenden oberflächenaktiven Mitteln oder Verdünnungsmitteln zersetzt worden sind. These properties are characteristic containing both azadirachtin solids, which have been prepared and handled in accordance with the above information, as well as for such solids are decomposed in a preparation with appropriate surfactants or diluents. Die Fähigkeit zur Aufrechterhaltung der freifließenden Beschaffenheit, auch in Form einer Zubereitung, hängt von der Entfernung der Lösungsmittel in den Feststoffen unter Verbleib einer annehmbaren Konzentration ab. The ability to maintain the free flowing nature, in the form of a preparation depends on the removal of the solvents in the solids while remaining an acceptable concentration.
[0031] [0031]
Eine weitere Analyse der Proben, die nach 14-tägiger Lagerung bei 55°C vorgenommen worden war, ließ darauf schließen, daß die Anwesenheit von Wasser einen deutlichen negativen Einfluß auf die Azadirachtin-Stabilität hatte. Further analysis of the samples, which had been made after 14 days storage at 55 ° C was allowed, indicate that the presence of water had a marked negative impact on azadirachtin stability. Es wurde festgestellt, daß sich die einzelnen festen Proben zwar nur geringfügig in ihrem Schwefel-Gehalt unterschieden, daß der Wasser-Gehalt der braunen Proben 002, 003 und 004 jedoch über 1% lag, während die weißen Proben 006 und 009 weniger als 1% Wasser enthielten. It was found that the individual solid samples, although only slightly differed in their sulfur content that the water content of brown samples 002, 003 and 004 but above 1%, while the white samples 006 and 009 less than 1% water contained.
[0032] [0032]
In den Tabellen werden für jede Azadirachtin-Konzentration die folgenden drei Werte angegeben: Die Menge (in Gramm) an Azadirachtin A ist vor dem Schrägstrich angegeben. In the tables, the following three values are given for each azadirachtin concentration: The amount (in grams) of azadirachtin A is given before the slash. Die Menge an Azadirachtin B (in Gramm) ist nach dem Schrägstrich angegeben. The amount of azadirachtin B (in grams) is specified after the slash. Die Gesamtmenge an Azadirachtin ist in Klammern aufgeführt. The total amount of azadirachtin is given in parentheses. K a , K b und K t beziehen sich auf die Geschwindigkeitskonstanten erster Ordnung der Zersetzung (in Einheiten von 1/Tag) für Azadirachtin A, Azadirachtin B bzw. das gesamte Azadirachtin. K a, K b and K t refer to the first order rate constant of decomposition (in units of 1 / day) for azadirachtin A, azadirachtin B or the entire azadirachtin.
2. Eine Zunahme der Wasserkonzentration wandelt eine stabile Azadirachtin-Zubereitung in eine instabile Zubereitung um. 2. An increase in the concentration of water converts a stable azadirachtin formulation is in an unstable preparation.
[0033] [0033]
Eine Probe von Azadirachtin der Charge 009, die sich in Beispiel 1 bei 55°C als stabil erwies, wurde mit H 2 O (13%) bis zur Erzielung einer homogenen Beschaffenheit vermischt und sodann in einem geschlossenen Glasfläschchen in einen Trockenschrank von 55°C gestellt. A sample of azadirachtin batch 009, which proved in Example 1 at 55 ° C as stable, was washed with H 2 O (13%) mixed until a homogeneous texture, and then in a closed glass vials in an oven at 55 ° C provided. Nach 1 Woche hatte sich die Probe braun verfärbt und war geschmolzen. After 1 week, the sample had turned brown and melted. Eine anschließende chemische Analyse (gemäß dem HPLC-Verfahren von Hull et al., J. Chromatography, Bd. 633 (1993), S. 300–304) ergab eine erhebliche Azadirachtin-Zersetzung. Subsequent chemical analysis (according to the HPLC method of Hull et al., J. Chromatography, Vol. 633 (1993), pp 300-304) showed a significant azadirachtin decomposition. Diese Probe wird in Tabelle 2 als 009WW bezeichnet. This sample is referred to in Table 2 as 009WW. Die Tabelle 2 bestätigt, daß die Stabilität von festem Azadirachtin direkt durch die Anwesenheit von Wasser im Feststoff beeinträchtigt wird, und zeigt, daß die Entfernung von Wasser aus dem Feststoff die Lagerbeständigkeit von festem Azadirachtin erhöht. Table 2 confirms that the stability of solid azadirachtin is directly affected by the presence of water in the solid, and shows that the removal of water from the solid increases the shelf life of solid azadirachtin.
Tabelle 2 Table 2
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3. Trockenes festes Azadirachtin weist im Vergleich zu Azadirachtin mit einem Gehalt an Wasser oder Ethanol eine längere Lagerbeständigkeit auf. 3. The dry solid azadirachtin, in comparison to azadirachtin containing water or ethanol longer shelf life on.
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Trockenes festes Azadirachtin wurde erhalten, indem man eine feste Azadirachtin-Probe der Charge 14 (014) 24 Stunden in einem unverschlossenen Gefäß in einem Trockenschrank Ofen bei 55°C trocknete, bis der Gehalt des Feststoffes an flüchtigen Bestandteilen weniger als 0,5% betrug. Dry solid azadirachtin was obtained by drying a solid azadirachtin sample of the batch 14 (014) 24 hours in an unsealed vessel in a dry box oven at 55 ° C until the content of the solid of volatile components was less than 0.5% , Die Probe wurde sodann in 6 Unterproben aufgeteilt. The sample was then split into 6 subsamples. Eine trockene Unterprobe (014D) wurde ohne weitere Behandlung verwendet. A dry subsample (014D) was used without further treatment. Eine zweite Unterprobe (014W1) wurde mit 1 Gew.-% H 2 O versetzt. A second subsample (014W1) was admixed with 1 wt .-% H 2 O. Eine dritte Unterprobe (014W4) wurde mit 4 Gew.-% H 2 O versetzt. A third subsample (014W4) was mixed with 4 wt .-% H 2 O. Die Unterproben 4, 5 und 6 wurden mit 1, 3 bzw. 5 Gew.-% Ethanol versetzt und erhielten die Bezeichnungen 014E1, 014E3 und 014E5. The sub-samples 4, 5 and 6 were treated with 1, 3 and 5 wt .-% ethanol and were designated 014E1, 014E3, and 014E5. Die Unterproben wurden in mehreren, dicht verschlossenen Fläschchen bei 55°C aufbewahrt. The sub-samples were stored in a plurality of sealed vials at 55 ° C. Die einzelnen Fläschchen wurden zur Bestimmung des Gehalts an Azadirachtin in periodischen Abständen entnommen. The individual vials were removed for determination of the levels of azadirachtin in periodic intervals. Die in Tabelle 3 aufgeführten Ergebnisse zeigen, daß die getrocknete Probe oder die Proben mit einem Gehalt an 1 Gew.-% H 2 O oder Ethanol wesentlich stabiler waren als die Proben mit einem Gehalt an höheren Mengen des polaren Lösungsmittels. The results listed in Table 3 show that the dried sample, or samples containing 1 wt .-% H 2 O or ethanol were much more stable than the samples containing higher amounts of the polar solvent. Ferner wurde aus Ergebnissen von Tabelle 3 festgestellt, daß höhere Konzentrationen an Ethanol einen etwas geringeren Einfluß auf die Stabilität im Feststoff ausüben als vergleichbare Konzentrationen an Wasser. It was also found from the results of Table 3 show that higher concentrations of ethanol a somewhat smaller effect on the stability in the solid exercise than similar concentrations of water.
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Somit wurde dargelegt, daß Azadirachtin enthaltende Feststoffe für eine Lagerung stabilisiert werden können, indem man sie bei einer Temperatur und für eine Zeitspanne trocknet, die ausreichen, um die Konzentration an flüchtigen polaren Lösungsmitteln auf 1,5% oder weniger, vorzugsweise auf 1,0% oder weniger und insbesondere auf 0,5% oder weniger zu verringern. Thus, it was demonstrated that azadirachtin-containing solids can be stabilized for storage by being dried at a temperature and for a time sufficient to reduce the concentration of volatile polar solvents to 1.5% or less, preferably to 1.0 % or less and in particular 0.5% or less to reduce. Eine Erwärmung auf 55°C für eine kurze Zeitspanne, z. B. 24 Stunden, scheint nur einen geringen oder gar keinen Einfluß auf die Stabilität von Azadirachtin zu haben. Heating to 55 ° C for a short period of time, such. As 24 hours seems to have little or no influence on the stability of azadirachtin. Die bevorzugte Erwärmungszeit läßt sich empirisch und als Funktion der Menge des im Feststoff eingeschlossenen polaren Lösungsmittels bestimmen. The preferred heating time can be determined empirically and as a function of the amount of the entrapped in the solid polar solvent. Beispielsweise wird in Tabelle 3 dargelegt, daß eine geringere Zersetzung nach 30-tägiger Behandlung einer getrockneten Probe festgestellt wird, verglichen mit einer nur 7-tägigen Behandlung einer Probe mit einem Gehalt an 1% Wasser. For example, set forth in Table 3 that a lower decomposition after 30 days of treatment of a dried sample is determined, compared with a 7-day treatment of a sample containing 1% water. Gleichermaßen ist die Zersetzung in einer Probe mit einem Gehalt an 4% Wasser nach 7 Tagen höher als in einer Probe mit einem Gehalt an 1% Wasser. Similarly, the decomposition is in a sample containing 4% water after 7 days higher than in a sample containing 1% water.
